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Ripa Lysis Buffer Soluzione Debole Biochimica Reagente

  • G2033-100ML.

Descrizione del prodotto

Ripa Lysis Buffer (debole)

Prezzo $ 18,3 / PC

Articolo n. G2033-100ml.

Introduzione al prodotto:

Ripa Lisis Buffer (Ripa Lysis Buffer) è un tampone di lisi tradizionale cellulare e tessuto. Il campione proteico dopo la lisi con il tampone di lisi Ripa può essere utilizzato per regolare occidentale, IP, ecc. Ci sono molte formule per il tampone di Lysis Ripa, che può essere diviso in forte, medio e debole secondo l'effetto. Questo lisato è un lisato debole di Ripa, ei suoi componenti principali sono 50 mm Tris-HCL, 150 mm NACL, 1 mm EDTA-NA2, 1% NP-40, 0,25% di deossicolato di sodio.
Contenuto del pacco:

Numero articolo del prodotto nome del prodotto Specifiche
G2033. Tampone di lisi Ripa. 30 ml / 100 ml


Condizioni di stoccaggio: conservare a 4ºC al buio, valido per 12 mesi.

Istruzioni:

Per campioni di tessuto:

1. I pezzi del tessuto vengono lavati con PBS a freddo per rimuovere le macchie di sangue. Tagliato a piccoli pezzi e posto in un omogeneizzatore.

2. Aggiungere 10 volte il volume del tessuto a questo reagente (aggiungere inibitore proteasi entro pochi minuti prima dell'uso) e omogeneizzare accuratamente con un smerigliatore di tessuto ad alta velocità.

3. Trasferire l'omogeneato in un tubo di centrifuga da 1,5 ml e agitare. Nel bagno di ghiaccio per 30 minuti, pipetta ripetutamente per garantire la completa lisi cellulare.

  1. Centrifuga AT12000G per 5 minuti e raccogliere il Supernatant, che è la soluzione totale proteica.


Per campioni di cellule coltivate:

1. Per le cellule aderenti:

A. Lavare le celle 2-3 volte con PBS. Assorbire a fondo il liquido rimanente l'ultima volta.

B. Aggiungere un volume appropriato di questo reagente (aggiungere inibitore proteasi entro pochi minuti prima dell'uso) nella piastra di coltura e nella bottiglia per 3-5 minuti. Durante questo periodo, il piatto di coltura e la bottiglia sono stati scossi ripetutamente per far contattare completamente le cellule i reagenti.

C. Raschiare le cellule e i reagenti con un raschietto cellulare e raccoglieli in un tubo di centrifuga da 1,5 ml.

2. Per le cellule di sospensione:

Raccogliere le cellule per centrifugazione, aggiungere circa 250 ul di questo reagente (aggiungere l'inibitore della proteasi entro pochi minuti prima dell'uso) per celle a 6 pozzetti e agitare.

Bagno di ghiaccio per 30 minuti, durante il quale volta, pipetta con pipetta 200L diverse volte ogni 10 minuti per garantire che le cellule siano completamente lised.

  1. Centrifuga a 12000 g per 5 minuti e raccogliere il supernatante, che è la proteina totale.


Precauzioni:

Per campioni di tessuto:
Circa 1 ml di questo reagente è aggiunto a Lyse ogni tessuto da 50 mg. Per i tessuti come cartilagine e pelle, il dosaggio dei reagenti può essere opportunamente ridotto per aumentare la concentrazione proteica.

Per campioni di cellule coltivate:

1. Sotto la normale densità cellulare, aggiungere circa 250L del lisato a ciascuna cella a 6 pozzetti.

  1. Può sembrare più spesso durante il cracking. Può essere pipettato ripetutamente finché non è liquido. Se è stato più spesso, è possibile utilizzare un vortice per agitare o aggiungere una quantità appropriata di lisato.

  2. Questo reagente è dannoso per il corpo umano, si prega di proteggerlo in modo appropriato.

G2033-100ML.


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