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Kit immunoistochimica Anti-coniglio Antibody secondario per IHC Western Blot

  • G1215-200T.

Descrizione del prodotto

Introduzione al prodotto:

Questo kit è un kit immunoistochisthemistry a due gradimenti ad alta sensibilità, adatto per il successivo sviluppo del colore degli anticorpi primari derivati ​​da coniglio. Il kit contiene IgG Anti-Conbbit Girl Anti-Rabbit Giggi. Questo prodotto è adatto per anticorpi primari derivati ​​da coniglio. Negli esperimenti di IHC e Western Blot, gli anticorpi secondari anti-coniglio di capra etichettati HRP sono uguali agli anticorpi primari derivati ​​da coniglio. Anticorpo (reagisce con l'antigene prima) si lega e poi reagisce con DAB. DAB è un substrato di perossidasi rafano (HRP). Sotto la catalisi di HRP, DAB produce precipitati marroni per raggiungere l'amplificazione del segnale e lo sviluppo del colore.

Contenuto del pacco:

Numero articolo del prodotto

nome del prodotto

Specifiche

G1215-200T.

Kit immunoistochimica

200t.

Condizioni di stoccaggio: trasporto di ghiaccio bagnato; Conservare l'anticorpo secondario a -20 ° C e la DAB Diluition e 50 × DAB Stock Solution Store a 4 ° C; Valido per 12 mesi.

Componente:

Numero di componenti

Componente

G1215-200T.

G1215-1.

DAB Diluent.

12,5 ml

G1215-2.

50 × DAB Kit

250 μl.

G1215-3.

Anticorpo secondario anti-coniglio di capra con etichetta HRP

100 μl.

Utilizzare il manuale

1

Fare un passo

1. Porta il proprio PBS (consigliato G4202, G0002), reagente per il counterstaining nucleare (soluzione di colorazione di ematossilina consigliata G1004, soluzione di differenziazione di ematossilina G1039, ematossilina che ritorna la soluzione blu G1040), alcool gradiente, xilene, tablet di montaggio, ecc.

2. Preparare la soluzione di lavoro dell'anticorpo secondario: diluire l'anticorpo secondario anti-coniglio di capra con etichetta HRP con PBST (pH 7.2-7.4) in un rapporto tra 1: 200 per ottenere la soluzione di lavoro dell'anticorpo secondario. Preparato per uso immediato, utilizzare entro 48 ore.

Preparare la soluzione di lavoro per lo sviluppo del colore DAB: aggiungere 20 μl di soluzione di soluzioni di 50 × DAb a ogni 1 ml di DAB DILUENT, mescolare bene per un uso successivo.

Istruzioni:

1. Secondo le procedure di routine immunoistochimiche, le sezioni del tessuto sono pre-deparaffinized, antigene recupero, bloccate e incubate con anticorpo primario, quindi lavato tre volte con PBS per 5 minuti ciascuna.

2. Incubazione anticorpale secondaria: aggiungere 50-100 μl della soluzione di lavoro anticorpale secondaria a ciascuna fetta per coprire completamente il tessuto e incubare a temperatura ambiente per 30-60 min. Lavare tre volte con PBS per 5 minuti ogni volta.

3. DAB Sviluppo del colore: aggiungere 50-100 μl di soluzione di lavoro DAB a ciascuna fetta, incubare per diversi minuti a temperatura ambiente, osservare sotto il microscopio per controllare lo sviluppo del colore all'effetto previsto, quindi lavare immediatamente con acqua per fermare il Sviluppo del colore

4. (opzionale) Ripristino dei nuclei cellulari: le sezioni sono macchiate con soluzione di colorazione di ematossilina per 3-5 minuti, quindi lavato con acqua del rubinetto; Dopo una rapida differenziazione con la soluzione di differenziazione di ematossilina per 3-5 s, lavato con acqua del rubinetto; Lavato con acqua del rubinetto o restituita a blu con soluzione di ematossilina 3-5 s.

5. Montaggio: le fette sono disidratate da alcool gradiente in base ai soliti gradini, trasparenti da xilene, e le diapositive sono montate con gomma neutra.

Precauzioni

1. Se lo sfondo è troppo scuro durante lo sviluppo del colore immunoistochimico, prendere in considerazione l'estensione del tempo di lavaggio, utilizzare una soluzione di blocco appropriata per il blocco, inattivare la catalasi endogena, accorcia il tempo di sviluppo del colore e ridurre la concentrazione dell'anticorpo secondario. Se non vi è uno sviluppo del colore o lo sviluppo del colore è troppo leggero, è possibile aumentare in modo appropriato la concentrazione dell'anticorpo primario e dell'anticorpo secondario per estendere il tempo di sviluppo del colore, quindi verificare se l'anticorpo secondario è normalmente sviluppato.

2. DAB è dannoso per il corpo umano, si prega di fare attenzione quando si maneggiandolo e si prende cura di evitare il contatto diretto con il corpo umano o l'inalazione del corpo.

G1215-200TQ.

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