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Hoechst 33342 Stain Reagent 1 mg / ml soluzione per la colorazione fluorescente del nucleo

Specifica: 1ml.
Numero CAS: 23491-52-3
  • G1127-1ML.
  • Servicebio
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Descrizione del prodotto

Introduzione:

Hoechst 33342 (Bisbenzimide H 33342, Hoe 33342) La formula molecolare è c27H28N6O · 3hcl, il peso molecolare è 561.93, e il numero CAS è 23491-52-3, che è una tintura fluorescente blu che penetra nella membrana cellulare al DNA del nucleo. Il fluido di colorazione è debole nella soluzione, ma il rinforzo della fluorescenza è incollato alla piccola scanalatura del DNA nella regione arricchita della sequenza in sequenza, e quindi viene utilizzata per la colorazione nucleare, o la colorazione del DNA convenzionale.

Questo prodotto è una soluzione, e la concentrazione Hoechst 33342 è 1 mg / ml per la colorazione e la concentrazione di lavoro comunemente utilizzata è raccomandata da 0,5 a 10 μg / ml. La lunghezza d'onda massima di eccitazione di Hoechst 33342 è 346 Nm, la lunghezza d'onda massima delle emissioni è 460 Nm; Dopo il legame con il DNA a doppio filamento, la lunghezza d'onda massima di eccitazione è di 350 nm, la lunghezza d'onda di emissione massima è 461 nm. Il nucleo può essere utilizzato per un segno di nucleo di cella o tessuto fisso o non fisso, e può essere testato da microscopio fluorescente o citometro a flusso ecc.


Stoccaggio e trasporto

Trasporto di sacchetto di ghiaccio (ghiaccio bagnato); -20 ° C protetto dalla luce, 12 mesi efficaci.

Passi

1. Diluire la soluzione di colorazione Hoechst 33342 (1 mg / ml) con PBS o altro buffer adatto a 0,5-10 μg / ml Hoechst 33342 Soluzione di lavorazione della colorazione;

2. Per celle fisse o sezioni di tessuto:

un. Per campioni di cella o tessuto fissi, rimuovere il fissativo dopo la fissazione e lavare 2-3 volte con PBS o altro buffer adatto per 3-5 minuti ogni volta (per rilevare le celle sospese, si prega di seguire il normale metodo operativo per le cellule sospese, tutti gli esperimenti bisogno di aggiungere centrifugazione e altri passaggi);

B. (Passo facoltativo) Se è necessario eseguire la colorazione dell'immunofluorescenza su celle fisse o tessuti, prioritizza i trattamenti correlati e quindi eseguire la colorazione Hoechst 33342 dopo il trattamento;

C. Prendere una quantità appropriata di Soluzione di lavorazione di Coloraing Hoechst 33342 per macchiare le celle o i tessuti fissi, coprire il campione e incubare a temperatura ambiente per circa 5 minuti;

D. Dopo aver rimosso la soluzione di lavoro di colorazione Hoechst 33342, lavare 2-3 volte con PBS o altro buffer adatto, ogni volta per 3-5 minuti;

e. Dopo aver montato la diapositiva o osserva direttamente sotto un microscopio a fluorescenza, la lunghezza d'onda di eccitazione è di 350 nm e la lunghezza d'onda delle emissioni è di 460 nm.

3. Per cellule viventi o tessuti coltivati:

un. Aggiungere una quantità appropriata di soluzione di colorazione Hoechst 33342 alla coltura cellulare, circa 1/10 del volume del mezzo di coltura cellulare, che deve coprire completamente il campione da colorare; Solitamente una soluzione di colorazione di solito 1 ml viene aggiunta a un pozzo della piastra di sei pozzi, e un pozzo della lastra 96 ​​pozzetto aggiunge 100 μl di soluzione di colorazione al mezzo; incubazione in un incubatore di 37 ° C per 10-20 minuti;

B. Dopo aver rimosso la soluzione di lavoro di colorazione Hoechst 33342, lavare 2-3 volte con PBS o altro buffer adatto, ogni volta per 3-5 minuti;

C. Osservare direttamente sotto un microscopio a fluorescenza, la lunghezza d'onda di eccitazione è di 350 nm e la lunghezza d'onda delle emissioni è di 460 nm.

G1127-1ML.

Precauzioni

1. La concentrazione e il tempo di incubazione della soluzione di lavoro di colorazione Hoechst 33342 possono essere regolati in base alla situazione effettiva.

2. I coloranti fluorescenti hanno problemi di spegnimento. Prova a completare il test lo stesso giorno dopo la tintura. Le compresse di montaggio a discesa anti-fluorescenza (consigliata G1401) possono essere utilizzate per rallentare la tempra della fluorescenza.

3. Si prega di indossare il camice da laboratorio e guanti monouso durante il funzionamento.

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