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G2038-100ML 100ml tampone di lisi IP per precipitazione immunol

Specifica:100ml.
Applicazione:Lyse celle o tessuti in condizioni non denaturanti per preparare campioni proteici.
Trasporto e stoccaggio:Trasporto bagnato della borsa del ghiaccio; conservare a -20 ℃, efficace per 12 mesi.
ml:
  • G2038-100ML.
  • Servicebio

Descrizione del prodotto

Panoramica

IP Lysate è un lisato che viene utilizzato per lisse celle o tessuti per preparare campioni di proteine ​​in condizioni non denaturanti. I campioni di proteine ​​ottenuti mediante la scissione di tessuti o cellule con questo lisato possono essere utilizzati in pagina, macchia occidentale, immunoprecipitazione, IP), co-IP, chip (cmatina immunopre-cipitazione), ELISA e altri esperimenti.

Gli ingredienti principali di questo prodotto sono 25 mm tris-hcl, 150 mm NACL, 1 mm EDTA, 1% NP-40 e 5% Triton X-100. Può essere applicato a tessuti animali o vegetali e campioni di cellule, e può anche essere utilizzato per campioni fungini o batterici.


PNome rodotto

Cin. No.

SPecificazione

Buffer di lisi IP.

G2038-100ML.

100 ml

Utilizzo del prodotto

Componente

G2038-10ML.

Buffer di lisi IP.

100 ml

Utilizzo:

Gli inibitori della proteasi sono forniti. Il lisato IP dovrebbe essere aggiunto con gli inibitori della proteasi prima dell'uso. G2006, G2007, G2008, ecc., Si raccomandano di prevenire la degradazione delle proteine. Il lisato IP menzionato nel seguente utilizzo significa che sono stati aggiunti gli inibitori della proteasi.


Per campioni di tessuto:

1. I blocchi di tessuto sono stati lavati con PBS pre-raffreddamento (consigliato G4202) per rimuovere le macchie del sangue, quindi tagliare in piccoli pezzi e collocati nell'omogeneizzatore.

2. Aggiungere 10 volte volume del tessuto del tampone di lisi IP e omogeneo a bassa temperatura (si consiglia di utilizzare lo strumento di rettifica del tessuto ad alta velocità KZ-III-F e KZ-III-FP, che è sviluppato indipendentemente sviluppato e prodotto da ServiceBio). Nota: la quantità di lisato IP può essere aggiunta in un rapporto di circa 50 mg di tessuto a 1 ml di lisato. Se il contenuto della proteina del tessuto è basso, il dosaggio del lisato può essere ridotto per aumentare la concentrazione di proteine ​​nella soluzione di estratto grezzo.

3. Trasferire l'omogenea in un tubo di centrifuga da 1,5 ml e oscillato. Bagno di ghiaccio per 30 minuti, durante il quale la pipetta è stata ripetutamente soffiata per garantire la completa lisi delle cellule del tessuto ad ogni 10 minuti;

4.for 12000G campioni, dovrebbe essere centrifugato per 5 minuti e raccogliere il supernatante, che è la soluzione proteica totale.

Per campioni aderenti:

1. Lavare le celle con PBS per 2-3 volte e disattivare accuratamente il liquido residuo per l'ultima volta.

2. Versare il lisato IP nella piastra di coltura cellulare e la boccetta secondo il rapporto tra il grado di cellule da 250 μl per pozzo di 6-pozzetto, scuotere il piatto di coltura e il pallone ripetutamente e rendere il lisato con il contatto completamente con le celle per 3-5 minuti.

3. Raschiare le celle con una spatola cellulare e raccogliere in un tubo della centrifuga.

4. Centrifuga a 12000 g per 5 minuti e raccogliere il supernatante, che è la soluzione proteica totale.

Per la cella di sospensione:

1. Lavare le celle con PBS per 2-3 volte e disattivare accuratamente il liquido residuo per l'ultima volta.

2. Versare il lisato IP nella piastra di coltura cellulare e la boccetta secondo il rapporto tra il grado di cellule da 250 μl per pozzo di 6-pozzetto, scuotere il piatto di coltura e il pallone ripetutamente e rendere il lisato con il contatto completamente con le celle per 3-5 minuti.

3. Raschiare le celle con una spatola cellulare e raccogliere in un tubo della centrifuga.

4. Centrifuga a 12000 g per 5 minuti e raccogliere il supernatante, che è la soluzione proteica totale.

Fo campioni batterici o fungini

1,1 ml di sospensione batterica è stata presa, il supernatante è stato rimosso dalla centrifugazione, e il liquido è stato lavato una volta con PBS per rimuovere completamente il liquido. Vortex per disperdere i batteri il più possibile.

2.Aggiungere 100-200 μl di lisato IP, turbinio delicatamente per mescolare bene i batteri e il lisato.

3. BAGNO DI BAGNO PER 10 MIN, DURANDO DURANTE La pipetta è stata ripetutamente soffiata più volte ogni 2 minuti per garantire la completa lisi dei batteri.

4.12000 g è stato centrifugato per 5 minuti e il supernatante è stato raccolto, che era la soluzione totale proteica.




Appunti:

1. Lo spessore può apparire durante il tessuto o la lisi cellulare. Il pipettore può essere ripetutamente soffiato o oscillato dallo strumento Vortex fino a quando non è liquido. Se è stato più spesso, è possibile aggiungere una quantità appropriata di liquido di cracking.

2. Questo reagente non contiene inibitori della proteasi. Si prega di preparare i propri inibitori della proteasi e aggiungerli prima dell'uso. Si consigliano G2006, G2007, G2008 e altri inibitori della proteasi relativi della nostra azienda.

3. La soluzione proteica totale ottenuta dalla pirolisi di questo prodotto è compatibile con il nostro kit di rilevamento quantitativo di proteine ​​BCA (G2026).

4. Si prega di indossare un cappotto di laboratorio e guanti monouso durante il funzionamento.


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