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G2002-100ml 100ml forte tampone di lisi Risa per cellule

Specifica:100ml.
Utilizzo:Lisi rapida di cellule e tessuti.
Trasporto e stoccaggio:Trasporto della borsa di ghiaccio bagnata; Conservare a 4.E tenere lontano dalla luce, valida per 18 mesi.
ml:
  • G2002-100ML.
  • Servicebio

Descrizione del prodotto

Panoramica

Ripa Lyis Buffer (Ripa Lysis Buffer) è una soluzione tradizionale rapida lise per cellule e tessuti. I campioni di proteine ​​ottenuti da tessuti e cellule è stato tagliato da Ripa Lysate può essere utilizzato per la pagina di routine, l'immunoprecipitazione occidentale, l'immunoprecipitazione (IP), il co-IP e altri esperimenti. Il fluido di cracking di RIPA ha molte formulazioni, secondo il suo effetto di cracking è diviso principalmente in forte, Tre tipi medi e deboli. Questo prodotto è un forte liquido di cracking di Ripa. I suoi componenti principali includono TRIS-HCL da 50 mm (pH 7.4), 150 mm NACL, 1 mm EDTA-2NA, 1% Triton X-100, 1% di acido deodossidolico sodio e 0,1% SDS.Questo prodotto è adatto per tessuti animali o vegetali E campioni di cellule, possono essere utilizzati anche per campioni fungonali o batterici.

Componente

G2002-30ml.

G2002-100ML.

Ripa Lysis Buffer (forte)

30 ml

100 ml

Utilizzo del prodotto


Utilizzo:

L'inibitore della proteasi è fornito. Il lisato Ripa (forte) dovrebbe essere aggiunto con inibitori della proteasi prima dell'uso. G2006, G2007, G2008, ecc., Si raccomandano di prevenire la degradazione delle proteine. Il lisato Ripa (forte) menzionato nel seguente utilizzo significa che sono stati aggiunti gli inibitori della proteasi.

Per campioni di tessuto:

1. I blocchi di tessuto sono stati lavati con PBS pre-raffreddamento (consigliato G4202) per rimuovere le macchie del sangue, quindi tagliare in piccoli pezzi e collocati nell'omogeneizzatore.

2. Aggiungere 10 volte volume del tessuto del tampone di lisi Ripa (Strong) e omogeneato a bassa temperatura (si consiglia di utilizzare lo strumento di rettifica del tessuto ad alta velocità KZ-III-F e KZ-III-FP, che è sviluppato indipendentemente sviluppato e prodotto da ServiceBio ). Nota: la quantità di Ripa Lysate (Strong) può essere aggiunta in un rapporto tra circa 50 mg di tessuto a 1 ml di lisato. Se il contenuto della proteina del tessuto è basso, il dosaggio del lisato può essere ridotto per aumentare la concentrazione di proteine ​​nella soluzione di estratto grezzo.

3. Trasferire l'omogeneato a un tubo di centrifuga da 1,5 ml e oscillato. Bagno di ghiaccio per 30 minuti, durante il quale la pipetta è stata ripetutamente soffiata per garantire la completa lisi delle cellule del tessuto;

4.for 12000G campioni, dovrebbe essere centrifugato per 5 minuti e raccogliere il supernatante, che è la soluzione proteica totale.

Per campioni aderenti:

1. Lavare le celle con PBS per 2-3 volte e disattivare accuratamente il liquido residuo per l'ultima volta.

2. Pour Ripa Lysate (forte) nella piastra di coltura cellulare e boccetta secondo il rapporto tra il rapporto di 250 μl di placca cellulare per pozzo di 6-pozzetto, scuotere il piatto di coltura e il pallone ripetutamente e rendono il lisato a contatto completamente con le cellule per 3- 5 minuti.

3. Raschiare le celle con una spatola cellulare e raccogliere in un tubo della centrifuga.

4. Centrifuga a 12000 g per 5 minuti e raccogliere il supernatante, che è la soluzione proteica totale.

Per la cella di sospensione:

1. Lavare le celle con PBS per 2-3 volte e disattivare accuratamente il liquido residuo per l'ultima volta.

2. Pour Ripa Lysate (forte) nella piastra di coltura cellulare e boccetta secondo il rapporto tra il rapporto di 250 μl di placca cellulare per pozzo di 6-pozzetto, scuotere il piatto di coltura e il pallone ripetutamente e rendono il lisato a contatto completamente con le cellule per 3- 5 minuti.

3. Raschiare le celle con una spatola cellulare e raccogliere in un tubo della centrifuga.

4. Centrifuga a 12000 g per 5 minuti e raccogliere il supernatante, che è la soluzione proteica totale.



Appunti:

1. Lo spessore può apparire durante il tessuto o la lisi cellulare. Il pipettore può essere ripetutamente soffiato o oscillato dallo strumento Vortex fino a quando non è liquido. Se è stato più spesso, è possibile aggiungere una quantità appropriata di liquido di cracking.

2. Questo reagente non contiene inibitori della proteasi. Si prega di preparare i propri inibitori della proteasi e aggiungerli prima dell'uso. Si consigliano G2006, G2007, G2008 e altri inibitori della proteasi relativi della nostra azienda.

3. Si prega di indossare un cappotto di laboratorio e guanti monouso durante il funzionamento.

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