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2 X Fast PFUS PCR MASTER MASHER MIX PRONTO DA PCR PCR PRONTO ASSEMARIO MIX con PFU DNA Polymerase DNTPS PUFFER PCR

Volume: 1ml.
  • G3305-01.

Descrizione del prodotto

Introduzione al prodotto:

Questa PCC PCR pronta da usare contiene polimerasi modificata PFU DNA, DNTPS e buffer di reazione PCR ottimizzato a 2x concentrazione. È adatto per la PCR convenzionale, la PCR della colonia, il modello complesso e il PCR del modello GC ad alta GC. Per l'amplificazione PCR, sono stati aggiunti solo modello, primer e ddh2o per rendere la concentrazione della soluzione mix 1x per eseguire la reazione PCR. Ha una forte capacità di amplificazione, velocità di amplificazione rapida e velocità di estensione fino a 5-15s / kb. Ha alta fedeltà e alta specificità. Il prodotto di amplificazione è un terminale piatto. Il caricamento della colorante è stato aggiunto ai prodotti e i prodotti amplificati possono essere utilizzati direttamente per il rilevamento di elettroforesi Gel Agarose.

Contenuto del pacco:

Gatto. No.

Descrizione del prodotto

Volume

G3305.

2x Fast PFUS PCR Master Mix

1ml / 5ml.

Condizioni di conservazione:

Trasporto della borsa di ghiaccio bagnata; Immagazzinato a -20 ℃ temperatura, valido per 12 mesi.

Utilizzo:

1. Sistema di reazione PCR consigliata:

Componente

20L RXN.

50L RXN.

Concentrazione finale

Modelloa

Variabile

Variabile

come richiesto

Primer in avanti (10um)b

0.8ul

2UL

0.4um.

Reverse Primer (10UM)b

0,88

2UL

0.4um.

2x Fast PFUS PCR Master Mix

10UL

25L

1x.

(DMSO, opzionale)c

(0.6ul)

(1,5L)

(3%)

ddh2o.

Aggiungi a 20UL.

Aggiungi a 50UL


A: Quando si utilizza il plasmide o il DNA del Phage come modello, il dosaggio consigliato è 10 NG-1 PG per 50ul System; Quando si utilizza il DNA genomico come modello, l'importo aggiunto consigliato è 250-50NG per sistema 50UL. Quando il cDNA è il modello, si consiglia di dilutarlo con 2-100 volte e aggiungere non più del 10% del sistema totale. Troppi modelli condurranno facilmente all'amplificazione non specifica, e troppi pacchi modelli porteranno facilmente a bassa efficienza dell'amplificazione PCR.

A: L'intervallo di concentrazione del primer finale è 0,2-1.0um e la concentrazione di primer consigliata è 0.4um. Troppe pochi primer possono portare a una bassa resa di amplificazione oa nessuna amplificazione, e troppi primer possono portare ad amplificazione non specifica.

C: Modello GC alto può aggiungere non più del 10% DMSO aggiuntivo al sistema di reazione.

2. Condizioni di amplificazione PCR consigliate:

Fare un passo

Temperatura

Time

Cicli

Denaturazione inizialea

98 ℃.

30s-120s.

1

Denaturazione

98 ℃.

5-10s.

25-35.

Ricotturab

50-72 ℃.

10-30s.

Estensionec

72 ℃.

5-15s / kb.

Estensione finale

72 ℃.

5-10 minuti

1

Presa

4-16 ℃.

Per sempre


A: Presaturation Time 30s è adatto per la maggior parte dei modelli convenzionali, il modello complesso può estendere il tempo della denaturazione a 2 minuti.

B: Per modelli complessi, il tempo di ricottura può essere esteso a 30 secondi con l'amplificazione dei primer allegati.

c: la velocità di estensione del plasmid e di altri modelli semplici è consigliabile per essere 5-10s / kb; Modello di genoma di routine Raccordo di estensione raccomandato di 10-15s / kb; Modelli complessi 15-30s / kb.

Appunti:

1. Per uso, si prega di scongelare accuratamente e mescolare bene. Dopo aver completato fusione, può essere memorizzato stabilmente a 4 ℃ per almeno 2 settimane per evitare il congelamento e lo scongelamento ripetuto.

2. Si prega di indossare abiti da laboratorio e guanti monouso.

G3305-01.

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